正確鑒定ABO血型是輸血前最重要的一項檢測，血型鑒定錯誤會導致嚴重的溶血性輸血反應甚至是死亡。目前血型鑒定最常用的方法是卡式微柱法，此法具有諸多優點，但由于血型抗原抗體反應的復雜性及各種因素的影響，往往會出現正反定型不符，不能鑒定血型的情況。常見的原因有如下幾點：

1.血漿中抗體減弱或缺失：白血病、腫瘤、免疫球蛋白水平降低等患者抗體減弱，老年人抗體水平生理性下降，嬰幼兒尚未產生抗體或抗體效價低，均影響反定型的鑒定?？赏ㄟ^加大患者血漿用量(2倍或4倍)的方法進行鑒定。

2.紅細胞抗原減弱：最常見的是白血病、惡性腫瘤等，抗原減弱或消失，干擾正定型，凝集減弱或消失，可加大患者紅細胞濃度或進行吸收放散實驗以確定抗原 。

3.不規則抗體：這一類抗體存在于患者血清中，可在反定型中與標準紅細胞上的相應抗原發生凝集（而與A或B抗原無關），導致正反不一致。抗體篩選試驗陽性，應用譜細胞可鑒定出不規則抗體種類。

4.自身免疫性溶血性貧血：患者紅細胞表面存在致敏自身抗體，DAT（直接抗人球蛋白試驗）陽性，有時正定型會發生非特異性凝集。同時血清中存在的自身抗體也能干擾反定型?？捎?7℃生理鹽水洗滌患者紅細胞，一般可排除干擾。

5.冷凝集素：高效價冷凝集素在體外4℃或室溫條件下可與自身紅細胞發生非特異性凝集反應，可出現正反定型全凝集的現象。用37℃生理鹽水洗滌紅細胞，去除紅細胞表面附著的冷凝集素，可獲得可靠地正定型結果。37℃溫浴患者標本，可消除血漿中游離的冷凝集素對反定型的影響。

6.亞型：由遺傳因素導致，即紅細胞A或B抗原弱化，正定型抗A或抗B有時不能檢測出抗原而不出現凝集，造成定型困難。進一步鑒定需正定型增加抗-H、抗-A1、抗-AB，反定型增加O細胞、A1細胞、A2細胞，還應進行吸收放散試驗、唾液中血型物質檢測等。

7.血漿成分異常：多發性骨髓瘤患者易使紅細胞發生緡錢狀凝集，在血清中加入1—3滴生理鹽水凝集可消失（真凝集不受影響）。某些藥物主要為血漿擴容劑如右旋糖酐、聚維酮、羥乙基淀粉等,易使紅細胞發生緡錢狀凝集。

8.造血干細胞移植：血液病患者進行ABO血型不同的異基因外周血干細胞移植后，受者原有血型的紅細胞不斷衰亡，最終被供者血型的紅細胞取代之，患者原有的同種凝集素在移植后逐漸消失，供者的干細胞在受者體內存活時，患者紅細胞上的血型變為與供者的血型一致，但血清中并沒有產生對應的抗體，會造成正反定型不一致。

疑難血型只是一種血型難以判定的現象，而非一種型別，當遇到難以鑒定的血型時，一定要首先核對各種信息及實驗操作無誤，然后了解病史：年齡、妊娠史、輸血史、臨床診斷等，設計針對性的試驗。